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产品展示 > 分子诊断用酶核糖核酸酶A
产品名称:核糖核酸酶A
产品简介: 核糖核酸酶 A(Ribonuclease A,RNase A),是一种采用基因工程技术表达和纯化获得的高纯度核糖核酸酶,分子量13.7 kDa,含 4 对二硫键。该酶是一种内切酶,可特异性识别并水解核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键。本品水解单链RNA活性最好,且在多种反应条件下均有活性。在低盐浓度(0-100 mM NaCl)下,可用来切割单链RNA、双链RNA以及RNA-DNA 杂交链中的RNA链,而高盐浓度(≥0.3 M)下,RNase A 仅水解单链RNA。该酶常用于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除 RNA,本品不含DNase和蛋白酶,可直接使用。另外,本品还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。
 
性  状
    本品为白色冻干粉。 
活性单位定义
    25℃,100 mM Tris-acetate (pH 6.5), 1 mM EDTA和1 mM cyclic 2', 3'-CMP 反应液中使每毫升每分钟A286 增加0.1的酶量定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。
使用方法
    本品主要用于DNA制备过程中RNA的水解去除:
    (1)质粒的微量提取:在限制性酶消化反应液中加入RNase A,终浓度20 μg/mL。 
    (2)质粒的大规模提取:细胞裂解液中加入RNase A,终浓度20 μg/mL,37℃,20~60 min,然后用酚-氯仿抽提,,最后用2M乙酸铵和2倍体积的100%乙醇沉淀。
    【注】:加入 EDTA可抑制可能存在的DNase酶活性。
规  格
    100 mg/支。
有效期
    -20℃可稳定保存三年。